HPLC儀器的量程范圍及其測試方法-華普通用
穩(wěn)定性(基線漂移和重復(fù)性)測試方法：
這里包括儀器的靜態(tài)基線漂移和動態(tài)基線漂移的測試方法：
一般來說，使用者不關(guān)心單個檢測器的靜態(tài)指標(biāo)，所以，可以不專門測試檢測器的靜態(tài)基線漂移。但是，作者認(rèn)為設(shè)計、制造者應(yīng)該測試靜態(tài)基線漂移這個指標(biāo)，測試方法與測試整機(jī)(系統(tǒng))的動態(tài)基線漂移完全相同。
動態(tài)基線漂移測試方法如下：冷態(tài)開機(jī)，預(yù)熱2小時，連續(xù)測試1小時。1小時內(nèi)的最大最小值之差就是動態(tài)漂移。(也有測試更長時間的，例如作者在FLD檢測器研發(fā)時，為了考察儀器的長時間漂移，連續(xù)測試48小時，儀器的漂移小于5mV)。
重復(fù)性及其測試方法：與漂移測試方法相同，對儀器進(jìn)行多次測試(作者認(rèn)為一般是5-7次)，其數(shù)據(jù)的符合程度就是重復(fù)性，一般用RSD表示。
量程范圍及其測試方法
1)定義
儀器能適用測量的范圍或儀器能滿足測量要求的范圍叫量程范圍。其表示方法為AUFS(Absorbance Unit Full Scale)或AU/FS(Absorbance Unit/Full Scale)。80年代以前，也有很多人用OD(光密度)這個概念表示Abs(Absorbance)，即用ODFS來表示UVD的量程，但是OD不符合光對物質(zhì)吸收的物理概念，不符合儀器學(xué)理論，所以，目前國際上已經(jīng)廢除“OD”概念，不能再使用“ODFS”了。
在實際的日常分析工作中，也有化學(xué)工作者用具體的化學(xué)物質(zhì)來描述HPLC的量程。但是不同物質(zhì)，由于摩爾吸光系數(shù)不同，表現(xiàn)出的靈敏度也不同，所以作者認(rèn)為用具體的化學(xué)物質(zhì)來描述HPLC儀器的量程不符合儀器學(xué)理論的要求。作者認(rèn)為，給出AUFS最合適，其最大優(yōu)點是這種表示方法與樣品的性質(zhì)無關(guān)，便于比較同一類型檢測器的性能優(yōu)劣。但是這種表示方法對使用者來說不大直觀、不大方便。目前，國際上的HPLC儀器的量程范圍一般為：0.005-2.5AUFS(例如Waters的HPLC)。少數(shù)優(yōu)質(zhì)儀器的下限為0.001AUFS,但是有些儀器給出0.001-3.0AUFS的量程是有水分的，因為UVD的雜散光一般都比較大，而雜散光是光吸收類分析儀器主要分析誤差的來源，它主要限制被分析樣品濃度(吸光度)的上限。所以，HPLC的UVD給出0.001-3.0AUFS的量程一般是不準(zhǔn)確的。
目前，國內(nèi)外很多HPLC儀器的UVD生產(chǎn)廠商不給儀器的量程，這是不妥的。因為，不給量程范圍就意味著不知道檢測器的靈敏度(下限)，不知道多少吸光度時儀器能達(dá)到滿度。當(dāng)然，目前有很多HPLC儀器的UVD生產(chǎn)廠商，給出了儀器對某一物質(zhì)的最小檢測濃度或最小檢測量，這在某種程度上也可以反映儀器的靈敏度，并且對使用者來說，比較方便、比較直觀。但是，這種表示方法只是對某一物質(zhì)而言，特別是會帶來樣品處理產(chǎn)生的誤差、容易低估儀器噪聲的影響，因此，從儀器學(xué)理論的角度來看是不科學(xué)的。
2)量程范圍測試方法
目前，國際上對HPLC的UVD的量程范圍設(shè)計指標(biāo)，一般在0.005-3.0AUFS內(nèi)。作者在研制HPLC的UVD檢測器時，用原上海大華儀表廠生產(chǎn)的XWT-204記錄儀的1V檔測試。當(dāng)對數(shù)放大器的差分放大器的總輸出為1V時，記錄儀滿度(100格)。當(dāng)儀器的有效光電信號從0.005-3.0V時，均可保證對數(shù)放大器的輸出為1V;此時，這個0.005-3.0V對應(yīng)的吸光度為0.005-3.0Abs。要求從0.005-3.0Abs時，光度準(zhǔn)確度都能保證在1%以內(nèi)(即1V±10mv)。如此測量3次并取均值，即是HPLC的量程范圍(0.005-3.AUFS)。
目前，國內(nèi)外許多制造商都用萘或者蒽來測試HPLC系統(tǒng)的靈敏度，這種做法也可以，但是從儀器學(xué)理論角度考量，作者認(rèn)為不科學(xué)。因為：①、不能給出儀器的測量范圍，只能給出萘的最小檢測濃度;②、試樣的配制會帶來很多誤差;③、這種方法所作的測試，實際上是計算出來的靈敏度，而不是測試出來的真正的靈敏度，不能反應(yīng)儀器真正的靈敏度。如果實際測試，肯定比計算的數(shù)據(jù)大很多。④、不與國際接軌，不便比較不同儀器的性能。雖說近幾年國內(nèi)外采用此方法的科技工作者比過去多，但是不能掩蓋方法的局限性。所以，最好的方法還是給出儀器的測量范圍。
還有人用靜態(tài)噪聲的2倍或3倍來計算最小檢測濃度，這樣計算出來的結(jié)果，同樣是不真實的。因為從儀器學(xué)理論角度來看，一般在正常情況下，最小檢測濃度是在系統(tǒng)處在動態(tài)的情況下測試的，所以計算最小檢測濃度就必須用動態(tài)噪聲，而不能用靜態(tài)噪聲。
還有人測試HPLC的最小檢測濃度時，采用一些計算公式(如：Cmin=2NC/H×20，式中：Cmin 為最小檢測濃度，N為儀器的噪聲;C為濃度，H為峰高)，計算時不考慮移動相的流速，這是不妥的。不考慮移動相的流速或計算公式中去掉移動相的流速，就意味著是靜態(tài)的最小檢測濃度，而使用者需要的是系統(tǒng)的動態(tài)最小檢測濃度。所以作者認(rèn)為這種計算方法很不合理，對使用者來講是沒有意義的，這種計算方法不可采用。